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        小鼠心肌梗死模型

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        小鼠心肌梗死模型

        心肌梗死指的是心肌的缺血性壞死,是一種急性且較為嚴重的心臟狀態。心臟作為血液循環動力中心這一功能的實現,需要冠狀動脈不斷提供血流供應,當冠狀動脈發生病變而狹窄或堵塞,使得冠狀動脈的血流急劇減少或中斷,便會相應的心肌出現嚴重而持久的急性缺血,心肌無法得到氧氣,最終導致心肌不可逆的缺血性壞死,心臟的收縮和舒張功能降低,機體供血不足,嚴重者最終導致機體死亡。
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        小鼠心肌梗死模型

        心肌梗死指的是心肌的缺血性壞死,是一種急性且較為嚴重的心臟狀態。心臟作為血液循環動力中心這一功能的實現,需要冠狀動脈不斷提供血流供應,當冠狀動脈發生病變而狹窄或堵塞,使得冠狀動脈的血流急劇減少或中斷,便會相應的心肌出現嚴重而持久的急性缺血,心肌無法得到氧氣,最終導致心肌不可逆的缺血性壞死,心臟的收縮和舒張功能降低,機體供血不足,嚴重者最終導致機體死亡。

        一、實驗動物:

        SPF級Balb/c小鼠,雄性,周齡為6w~8w,體重為23g~27g。

        二、實驗周期:

        0h、3h、 6h 、 12h 、24h 、72h

        三、建模方法:

        1、3%戊巴比妥鈉80mg/kg腹腔注射麻醉,用小鼠剃毛器剃除小鼠胸部及腋下毛發(充分暴露手術區),用碘酒和75%乙醇手術區消毒。

        2、氣管插管:麻醉后,夾址檢測無反應即可進行MI手術。打開外置光源,顯微鏡開關,打開呼吸機,設置好各參數(呼吸頻率110bpm),將氣管插管沿聲門插入氣管,取下小鼠接上呼吸機,觀察小鼠呼吸狀況,胸闊起伏與呼吸機頻率一致表示插管成功,即可進行MI手術。

        3、小鼠采用右側臥位,用眼科剪在左前肢腋下, 用顯微剪于三、四肋間打開胸腔充分暴露心臟,顯微直鑷輕輕夾起少量心包并于左心耳下撕開少許心包,充分暴露左冠狀動脈前降支(LAD)或所在區域。

        4、結扎冠狀動脈:于顯微鏡下找到LAD走向或可能所在位置,持針器持取7-0帶針縫合線,于左心耳下緣2mm處進針,縫線穿過LAD,以完全阻斷LAD血流。

        5、關胸:結扎完后,6-0縫線完全縫合胸腔開口(保證無縫隙,無錯位)關關閉胸腔,由內向外逐層縫合各層肌肉和皮膚。

        6、術后管理:術后密切關注小鼠狀態,有無呼吸異常等。待小鼠自然蘇醒后將小鼠從呼吸機上取下并取下氣管插管,正常飼養。

        7、模型評價

        (1)心臟功能評價

        由Laplace定理可知:S=Pr/2h,P為心室內壓,r為心腔內徑,h為心壁厚度。在心臟壓力負荷過重的情況下,為適應心臟做功增加,室壁厚度增加,左室室壁應力增加,提高心臟收縮功能起到早去代償的機制;最終發展為慢性心力衰竭甚或心源性猝死??赏ㄟ^超聲或血流動力學檢測來評價心功能。M超圖像,測量左室舒張末期及收縮末期內徑(LVIDd、LVIDs),同時系統將會自動計算出相應的射血分數EF%及左室短軸縮短率(FS%)。

        (2)TTC染色測量梗死面積

        迅速取下心臟,清潔并擠壓心臟蘸干血漬,4°C生理鹽水沖洗干凈后蘸干,于-20°C冰箱冷凍15min至心臟變硬,取出并用刀片自心尖向心底沿房室溝方向切成1mm厚切片,共切5片,迅速將切片置于5ml 37°C 1% PH為7.4的TTC磷酸緩沖液中,水浴15min,TTC染色后梗死區為白色,梗死邊緣區為磚紅色,正常區為紅色。

        (3)病理學評價

        取出心臟,剔除血管、脂肪等雜質,心臟放紗布上蘸干殘留的血漬和溶液并稱重后放入4%多聚甲醛溶液中保存,24h后行脫水、包埋、石蠟切片,各個標本選擇固定位置(乳頭肌水平)切片,做HE染色。HE 染色結果可見,對照組心肌排列整齊、細胞質豐富均勻、間質正常;模型組部分心肌細胞核丟失、心肌細胞呈空泡樣變、梗死區可見心肌組織紊亂、梗死區心肌細胞消失,代之以纖維瘢痕組織。

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